Prueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en la Enfermedad Cerebrovascular Isquémica

Fig. 1: Reacción en Cadena de la Polimerasa
Fuente: http://www.socmucimm.org/wp-content/uploads/2014/06/The-Polymerase-Chain-Reaction.png

Tema	Efectos neuroprotectores de (-) - Epigallocatechin-3-Gallate (EGCG) contra la isquemia focal / lesión por reperfusión en ratas a través de la atenuación de la inflamación
Objetivo	Demostrar la acción protectora de EGCG contra la lesión por reperfusión después de la tMCAO (Oclusión transitoria de la arteria cerebral media) al inhibir la liberación de factores inflamatorios y la supresión de la regulación al alza de COX-2, iNOS y NF-κB/p65 a nivel tanto de ARNm como de proteína.
Muestra Biológica	Cerebros isquémicos de ratas cortados en siete secciones coronales con un grosor de 2 mm cada una.
Ácidos Nucleicos	ARNm transformado por Transcripción Inversa a ADNc.
Genes	COX-2, NF-κB/p65, iNOS.
Tipo de PCR	PCR Cuantitativa en Tiempo Real: Las condiciones de PCR fueron las siguientes: 94 ° C durante 2 min, 94 ° C durante 20 s, seguidos de 40 ciclos de 58 ° C durante 20 s y 72 ° C durante 20 s. La gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH) y la β-actina sirvieron como control endógeno.
Visualización	Electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato sódico (SDS-PAGE) al 10% (p/v) y se transfirieron a membranas de PVDF. [1]

PCR en Tiempo Real (Q-PCR) [2]

1.  Zhang F., Li N., Jiang L., Chen L., Huang M. Neuroprotective Effects of (−)-Epigallocatechin-3-Gallate Against Focal Cerebral Ischemia/Reperfusion Injury in Rats Through Attenuation of Inflammation. Neurochemical Researchs [Internet]. 2015 [citado 18 May 2019] 40; 1691–1698. Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007/s11064-015-1647-5
2. PCR EN TIEMPO REAL (Q-PCR). YouTube: Luis Fernando Salazar; 2016. Disponible en: https://www.youtube.com/watch?v=UOZ4s24RUrI